金黃色葡萄球菌測試片          

 
1、原理及適用范圍
    金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一，其侵襲力很強，能產生多種致病物質如：腸毒素、凝固酶等；可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛生問題，我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。金黃色葡萄球菌測試(FilmplateTM Staphylococcus aureus BT206) 含有選擇性培養基和專一性的酶顯色劑，運用微生物測試片專有技術，做成一次性快速檢驗產品，一步培養15～24h就可確認是否有病原菌的存在，大大地簡化了檢測程序。本產品適用于各類生、熟食制品，飲料，糕點類，調味品，奶制品等的快速檢測。執行標準：食品安全國家標準食品微生物檢驗黃色葡萄球菌檢驗（GB/T 4789.10-2010）。

2、操作方法
2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液，調節樣品勻液pH至6.0～8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖后成為1:100的樣品勻液，以此類推，每次換一支吸管。
2.2、接種：一般食品選2～3個稀釋度進行檢測，將金黃色葡萄球菌測試片（BT206）置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養基凝固，每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。
2.3、培養：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養箱內，堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃，培養15～24h。

3、結果判讀
    培養后，測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌；呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本，最好用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

4、計數原則及報告方式
4.1、選擇菌落數在20～200個之間的紙片進行計數。
4.2、若兩個稀釋度的菌落數均在20～200之間，則取其平均菌落數乘以稀釋倍數，即為每毫升（或每克）樣品中金黃色葡萄球菌數。
4.3、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數都小于20，則計數稀釋度最低的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之；如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數報告之。
4.4、如果所有稀釋度的菌落數都大于200，計數最高稀釋度的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。計數菌落數大于200的測試片時，也可計數一個或兩個具有代表性的方格內的菌落數，換算成單個方格內的菌落數后乘以20（濾紙區面積為20cm2），即為測試片上估算的菌落數。報告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示。

5、附加說明
5.1、本產品對于提高衛生行政監督部門應對細菌性食物中毒等突發性公共衛生事件的能力，具有重要的作用。
5.2、山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明，當金黃色葡萄球菌在0～9個菌落范圍內時，測試片與血平板均能檢出，作為致病菌不得檢出的標準要求，可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。
5.3、經試驗，該測試片的檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。對純菌的檢測下限可達3cfu／mL，與營養瓊脂計數、Baird-Parker培養計數和顯色培養基計數比較，檢測結果均無顯著差異。（食品研究與開發2009，30（1）：94-97）
5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

6、保存條件
    本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水，最好在拆封前將整包回溫至室溫。